无菌操作规范

1、操作前准备 操作环境应清洁、宽敞、定期消毒；物品布局合理；无菌操作前半小时应停止清扫工作、减少走动、避免尘土飞扬；工作人员应做好个人准备，戴好帽子、口罩，修剪指甲并洗手，必要时穿无菌衣、带无菌手套。

2、操作中保持无菌 工作人员应面向无菌区，手臂应保持在腰部或操作台台面以上，不可跨越无菌区避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏； 用无菌持物镊取用物品。无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内。一套无菌物品仅供一位患者使用，避免交叉感染；无菌操作中，无菌物品疑有污染或已被污染，应予更换并重新灭菌。

3、无菌物品保管 无菌物品必须与非无菌物品分开放置；无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，并按失效期先后顺序排放。

定期检查无菌物品的灭菌日期及保存情况。无菌包在未被污染的情况下保存期一般为7天，过期或受潮应重新灭菌。

一、开始实验前15分钟，在更衣间更换细胞房专用拖鞋进入细胞房，打开生物安全柜（超净台）的紫外。在实验室准备间将细胞房风机打开，并将细胞房外空调视气温选择是否打开并调整至合适温度。

二、进入细胞房时，实验人员首先在更衣间更换无菌服，换好细胞房专用拖鞋，戴好口罩、手套。帽子须遮盖全部头发、口罩须盖住口鼻，并认真洗手。细胞房内如果有不洁的口罩、手套（包括手套袋）、鞋套，应及时扔进垃圾桶。实验白大褂应整齐挂入衣橱，鞋子于鞋柜摆放整齐，保持更衣间干净整洁。

三、从更衣间进到风淋室再进到细胞房有两道门，进到风淋室后先打开分淋并关门，经过分淋才能打开进细胞房的门。两扇门不能同时打开。

四、关掉所有紫外灯，将废液桶放到每个实验台备用，给垃圾桶套上垃圾袋，并从冰箱中取出当天需要用到的培养基及相关试剂预热到室温。

五、实验中，手套袖边要用酒精棉球充分消毒，以避免人为带进污染物。培养基等外来物表面要用酒精棉球擦干净再放入超净台。培养瓶等瓶口需在火边消毒后再拧开